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教了。
先问个问题,从血清纯化IgG,需要经过哪些纯化步骤?我现在是用辛酸-硫酸铵沉淀,然后过DEAE-纤维素阴离子交换柱,感觉效果不太好。[/color][/size],[quote]原帖由 [i]NB
2014年09月05日发布人:蒜泥面条
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探讨一下。
我先把园子里关于包涵体纯化和蛋白复性这块非常有价值的帖子整理出来供广大战友参考。[/b][/color][/size],[size=2][color=Black][b]请问老师,我想用色谱柱纯化包涵体具体怎么操作?[/b
2013年04月11日发布人:ukonptp
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[color=Black][size=2]
本人有一蛋白,包涵体形式存在,分子量16.7KD,等电点7.6
1.阳离子柱CMFF纯化,将蛋白溶解在9M尿素中,调PH=4.0,BufferA,B,C的PH=4.0,过柱子后,蛋白大部分
2014年01月22日发布人:misswu61
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选择载量更高的填料,如果你不需要活性可以在变性条件下去纯化,总之最好是先选择镍柱,别的都很难摸条件得到好的结果.[/color][/size],[size=2][color=Black]常用的阳离子主要有两种:
一种是CM52,价格
2014年05月10日发布人:嗅嗅
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各位战友,大家好,我是一个原核表达纯化的新手,手里有两个待纯化的蛋白,准备纯化脱盐后给细胞用。
蛋白是在N端有6his标签,用的是Ni柱纯化(AKTA一款比较老的纯化仪)。
大致步骤如下
2013年10月31日发布人:#甜#
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这是我第一次用Ni柱纯化的蛋白SDS-PAGE结果:左侧是分子量标记,右侧最亮的条带是目的蛋白,但是还有不少的杂蛋白污染。不知这样的结果怎么样?是不是分离纯度太低,需要改进?我分离蛋白采用的是
2013年05月13日发布人:如影随形
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各位战友!我已经做纯化三个月了还没出来!觉得快绝望了!我纯化6his蛋白,用过INvetrogen的Ni离子用过Clontech的Co离子,也用过pH8.0,7.0,6.8的Buffer,可是
2013年05月18日发布人:红茶可乐
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[hide] [table][tr][td]诊状
[/td][td]可能的原因
[/td][td]解 决 方 法
[/td][/tr][tr][td=1,6]( 一 )
保留时间变化
[/td][td]1. 柱温变化
2023年07月07日发布人:zxlyid
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[size=2][color=Black][b]请问一个问题:在镍柱纯化目的蛋白过程中,用咪唑洗脱蛋白,那么咪唑就会与镍离子结合,那用什么方法去除咪唑呢?[/b][/color][/size],[size=2][color=Black
2013年04月11日发布人:ffaa
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[size=2][color=Black][font=Impact]
本人用DEAE Sepharose FF纯化一种酶,柱子为1.6X30cm,柱床高约20cm,上样缓冲液20mM Tris-HCl,用0—0.5M NaCl梯度洗脱
2013年06月10日发布人:yapuyapu